常规病理切片如何制成

上海中医药大学附属龙华医院  项逸伦

　　在临床上，病理检验是疾病诊断的“金标准”，其中病理切片作为病理诊断中的关键部分，其产生的影响极大。很多人知道出具一份病理诊断报告时间较长，少则一个星期，多则半个月，这主要与病理切片的制作复杂有关。但多数人不了解病理切片的制作，以为很简单，其实大家都想错了，病理切片的制作难度非常大，不信可以看看下面的论述。以下即为一张常规病理切片的制作过程：

　　1.组织固定

　　在临床医生在手术中完成组织取样后，标本会及时被送入病理科，病理科人员会在30分钟内使用10%中性福尔马林进行固定，其中活检小标本大概浸泡6⁓8小时，大标本需要浸泡24⁓28小时。

　　2.病理取材

　　病理科的人员会对标本进行细致、全面的检查，从中找出病变的部位后会依据标准进行反复核对，然后从中找出典型的病变位置并切除，再将切除的组织放入特定的包埋盒，接下来会进行编号，此时标本才算有了“身份”。完成这一环节后则会将其放入脱水机进行处理脱水、透明、浸蜡。

　　3.脱水、透明、浸蜡

　　这一过程主要在脱水机内完成，其中先要经过梯度酒精置换出病理组织中的水分，然后会通过二甲苯透明，液体石蜡浸泡，这一过程耗时较长，也是病理检测花费时间较多的环节之一，一般需要用到14小时左右。

　　4.组织包埋

　　在完成上述环节的操作后，病理组织已经完成了脱水、透明、浸蜡的处理，此时需要将其放入融化的石蜡中，然后等待石蜡的凝固。在等待的过程中石蜡会将其中的病理组织牢牢包裹住，因此这一环节也称为包埋，能够为后续检查提供助益。

　　5.切片制备

　　在这一处理环节中需要使用到石蜡切片机。具体来说，在完成包埋后病理组织会被牢牢固定在石蜡中，然后将石蜡块固定在切片机上进行切片处理，每个都需要切成3⁓5微米厚的薄片。完成这一操作后会将薄片放入45℃的温水中展平，然后将其捞出并放置在涂有防脱剂的载玻片上，再将其放入高温烤箱进行烘烤，接下来则会进行染色处理。

　　6.染色+封片

　　这一环节是病理组织切片中比较重要的环节，其中切片要进行HE染色，首先切片要经过二甲苯脱蜡，而且不同梯度的酒精能够溶解附着在切片上的二甲苯残液，完成后则需要使用苏木素染液进行细胞核染色，染色后要进行流水冲洗，再使用盐酸-分化液进行分化处理，这一环节完成后则要用伊红进行包浆染色，并用流水清洗后经酒精脱去余色，二甲苯透明，这样才算是真正完成了染色这一环节。在完成染色后需要进行最后一步“封片”，封片时要在玻片上滴加一滴中性树胶，覆盖上清洁的盖玻片，然后等待其变干，此时一定要注意不能产生气泡哦。

　　以上即为病理切片的制作过程，当然后续还需要进行查对和标签粘贴，然后对病理组织进行分析，以了解具体病变。